花生仁及花生仁制品中黄曲霉毒素

天然毒物

薄层色谱法

              
a 薄板制备
    称30gB(b)所述硅胶，放入300ml具塞锥瓶中，按制造推荐量加入水，剧烈振荡1min，倒入铺板器中，按不同批次的硅胶的需要调节水的加入量使匀浆涂布时保持一致，立即将5块20×20cm玻璃板涂上0.25mm厚的硅胶悬浮液，将薄板放置至胶化〔约10min〕；必要时为了得到较好的黄曲霉毒素分辩率及较小扩散点，可将硅胶溶液厚度调节为0.5mm。在80℃下干燥大于等于2h，或110℃下大于等于1h，置于带活性硅胶保干剂的保干器中备用。色谱板的制备：在距薄板底边16cm处刻线以使展开剂停止，在薄板距边缘约0.5cm划线，或除去边缘0.5cm硅胶以防止边缘效应。或选用20×20cm预先铺好的符合46-1B(d)及b(b)测试的板。
b TLC初步实验
    〔若黄曲霉毒素含量范围已知时，此步可以略去〕取下含提取物的试管的盖子，加入200μl苯-乙腈(98+2)溶液，用聚乙烯盖密封好，剧烈振荡溶解，最好用涡漩振荡器。在聚四氟乙烯盖上钻一小孔，使10μl注射器的针头可以通过，在柔和的白炽灯光下，在板上离底边约4cm的线上尽量快速地点2，5，及两个10μl点，将试管中剩余部分保存备定量分析。在同一板上点2，5，10μl黄曲霉毒素标准溶液〔46－4D〕或分辨参考标准(46-4E)，在10μl两个点中的一点点上5l的分辨参考标准〔46-4E)，以展示是否获得了合适的分离。$$在无衬层析缸的槽中放入50ml丙酮-氯仿(1+9)，若展开罐不是Thomas-Mitchell产品，使用其他类型的展开罐，要保证溶剂深度为约2cm，根据硅胶及展开条件变化，丙酮-氨仿溶液组分在(5-95)至(15-35)之间变化，每个展开器只放一块薄板，将槽放到靠近展开器的某一边，这样可以保证涂布的表面在展开中暴露部分最大，立即插入薄板并盖上展开器。$$在23－25℃展开40min或至黄曲霉毒素的Rf值在0.4－0.7之间，若浓度变化时则要改变展开时间。若展开时间大于90min则要调整展开剂。将薄板从展开器中取出，室温下挥发出溶剂，涂布面朝上，在暗室中用长波紫外灯从