营养添加剂中的有效赖氨酸

维生素和其它营养物

自动测定法

              
A 原理
    1-氟-2，4-二硝基苯〔DNFB〕与蛋白质中游离∈-氨基反应，生成DNFB-∈-氨基赖氨酸，此产物不为酸水解，样品经酸水解后，用氨基酸分析仪测定无效赖氨酸。对未经酸水解的样品测定总赖氨酸，二者之差即为与DNFB结合的有效赖氨酸。
B 试剂
    〔全部用无离子水〕
B.a 柠檬酸钠缓冲液
    pH2.20±0.03。溶解19.6g柠檬酸钠·2H2O于H2O中，加入16.5ml HCl，5.0ml硫二甘醇〔TG〕，1.0g Brij-35〔加热使溶于H2O中〕和0.1ml正辛烷，并稀释至1L，用前过滤。
B.b 柠檬酸钠缓冲液
    pH5.28±0.02。溶解137.26g柠檬酸钠·2H2O于H2O中，加26.0ml HCl，4.0g Brij-35〔加热溶解于H2O中〕和0.4ml正辛酸，并稀释至4L，用前过滤。
B.c 含2%正丙醇的柠檬酸钠缓冲液
    pH5.28±0.02。溶解137.26g柠檬酸钠·2H2O于H2O中，加26.0ml HCl，4.0g Brij-35〔加热溶解于H2O中〕和0.4ml正辛酸，并稀释至4L，用前过滤。
B.d 醋酸钠缓冲液
    4N pH5.51±0.03，加1088g NaOAc·3H2O至800ml H2O中，在蒸汽浴或水浴上边加热边搅拌直至溶解完全，冷至室温，搅拌下加入200ml HOAc；加H2O至最终体积为2L，必要时调节pH(1g NaOH/2L可使pH改变0.02)，用前过滤。
B.e 再生试剂
    制备含