维生素AD浓缩剂中维生素D

维生素和其它营养物

液相色谱法

              〔适合于每克维生素AD浓缩油剂，粉剂和水悬浮液中，维生素D的含量大于等于5 000IU/g。〕
A 原理
    将维生素AD油溶液溶解在流动相中。用溶于水的酶处理干的浓缩剂和水悬浮剂，并抽提。通过液相色谱将维生素D和维生素D前身从维生素A酯和杂质中分离出来。使用转换因子将维生素D前身按维生素D计算。维生素D是维生素D和维生素D前身的总和。
B 仪器
    
B.a 液相色谱
    具有254nm波长，紫外检测器。典型的操作条件：纸速：1cm/min；流动相流量：2.6ml/min〔约100atm〕；检测器灵敏度：0.008AUFS；温度：室温；阀进样容积：20μl。如果系统适应性试验符合，则可以替代不同柱长的和不同牌号的填充料，且进样容积可以在10－250μl范围内改变。
B.b 色谱柱
    不锈钢材质，250×4.6〔内径〕mm，充填柱粒度5μm，通过系统适应性试验。流动相为含有0.3%(v/v)正戊醇的正已烷。维生素D前身和维生素D的保留时间分别为9min和18min。
C 试剂
    
C.a 正已烷
    色谱级。通过其内装填500g，50－250μm硅胶的60×8cm柱子干燥。该硅胶预先在150℃干燥4h。
C.b 正戊醇
    试剂级。
C.c 流动相
    正已烷和正戊醇(997+3)。如果必要，则可调整组分的比例，使之符合适应性试验。
C.d 甲苯