强化牛奶和奶粉中维生素D

维生素和其它营养物

液相色谱法

              〔应用于液体牛奶和奶粉含维生素D大于等于1IU/g〕
A 原理
    样品经皂化和提取，维生素D及异构体在净化柱上与干扰物分离。第二根柱子将维生素D与杂质分离，由于在皂化过程中生成一定量的维生素D前身，所以维生素D的含量需校正。维生素D是维生素D和维生素D前身之总和。
B 仪器
    
B.a 液相色谱仪
    具有254nm波长紫外检测器及2根柱子：净化柱与分析柱。
B.b 净化柱
    不锈钢250×4.6〔内径〕mm，用粒度为10μm Sil-60D-10CN填装，典型操作条件为纸速：1cm/min；洗脱液流量：1ml/min；检测器灵敏度：0.128AUFS；温度：室温；阀进样容积200μl；流动相为含0.35%正戊醇的正已烷。
B.c 分析柱
    不锈钢，250×4.6〔内径〕mm。充填粒度为5μm，通过系统适应性试验。典型操作条件：纸速1cm/min；洗脱液流量2.5ml/min；检测器灵敏度0.008AUFS；温度：室温；阀进样容积500μl；流动相为含0.35%正戊醇的正已烷液。
C 试剂
    
C.a 正已烷
    
C.b 抗氧剂溶液
    0.1%丁基化羟基甲苯〔BHT〕的正已烷溶液。
C.c 维生素D标准溶液
    参比标准麦角钙化醇〔如样品标明维生素D2〕或胆钙化醇〔如标明含维