维生素制剂中维生素D

维生素和其它营养物

液相色谱法

              〔适用于含量大于等于100，000IU胆钙化醇或维生素D3/g的油剂；大于等于20，000，000IU胆钙化醇/g的树脂状样品；和大于等于25000IU胆钙化醇/g的粉剂和水悬浮剂。〕
A 原理
    干的浓缩物及水悬浮剂被皂化和提取。维生素D树脂及油性溶液溶解在溶剂中。用液相色谱将维生素D及维生素D前身与杂质分开。用校正因子将维生素D前身换算成维生素D。维生素D是维生素D和维生素D前身的总和。
B 仪器
    
B.a 液相色谱仪
    具有254nm紫外检测器。典型的操作条件：纸速1cm/ml；洗脱液流速2ml/min〔约100atm〕；检测器灵敏度0.128AUFS；温度：室温；阀进样体积20μl。
B.b 色谱柱
    不锈钢150×4.6〔内径〕mm，用5μm粒度的Si60填装，通过系统适用性试验，在进柱以前，流动相必须被抽送通过100cm×4mm不锈钢柱，其内填充有经250℃干燥4h的50－250μm硅胶。只要系统适应性试验符合要求，则不同的柱长，和不同牌号的填料可被替代，且进样量也可在10－30μl间变化。
C 试剂
    
C.a 正已烷
    光谱纯，通过60×8cm直径的柱子干燥，柱子中装有500g经150℃干燥4h的50－250μm硅胶。
C.b 正戊醇
    试剂级。
C.c 流动相
    正已烷和正戊醇(997+3)，必要时调节组分比例以满足适应性试验。