谷物中的淀粉

谷物

葡萄糖淀粉酶法

              
A 试剂
    
A.a 葡萄糖淀粉酶溶液
    10mg/mlH2O。酶的纯度是关键。
A.b D-葡萄糖标准溶液
    400mg无水葡萄糖/L。在使用前放置4h使其完成旋光改变。
A.c 醋酸缓冲溶液
    4M，pH4.8。用H2O稀释120mlHOAc和164g无水NaOAc到1L。
A.d 三磷酸盐缓冲溶液
    pH7.0。将36.3g三羟甲基甲胺和50.0gNaH2PO4·H2O〔或45.5g无水的〕溶于500mlH2O。用H3PO4在37℃调节pH到7.0，并在37℃用H2O稀释到1L。
A.e 酶-缓冲-发色团混合物
    在100ml三磷酸缓冲液中溶解；30mg葡萄糖氧化酶〔黑曲霉二型〕3mg过氧化酶〔辣根Ⅰ型〕和10mg邻茴香胺.2HCl。在把邻联茴香胺加到酶-缓冲液混合液之前，应先在少量混合液中使其完全分散。在4℃贮存应不超过10天。
B 测定
    〔对含有从葡萄糖当量小于14的淀粉中产生的右旋葡萄糖和多糖的产品，用2份煮沸的80%乙醇和2份在25℃的80%乙醇提取。由于乙醇抑制葡萄糖淀粉酶的活性，所以应蒸发完全除去〕。$$把样品磨碎到小于0.5mm〔40号筛〕。测定湿度，称0.5g样品〔含量不超过0.5g的淀粉样品重应不超于1.0g〕放入干燥的已称重的锥形瓶。边搅拌边加入25mlH2O。如有必要应调节pH为5－7。慢慢搅拌下煮沸3min，然后在135℃蒸压1h〔对某些淀粉可以在较低压力和温度下蒸压，但不少于1h，达到完全凝胶化〕。从蒸压器中取出，冷却到大约