动物组织中的3，5-二硝基邻甲苯酰胺〔ANOT〕残留物

动物组织中的药物和饲料添加剂

分光光度法

              
A 原理
    ANOT的代谢物，是用无花果蛋白酶从磨碎的组织中消化酶面释放的。用NaHCO3处理消化物并用丙酮萃取。加CHCl3使溶液分为2层。浓缩有机层并通过氧化铝柱。用CHCl3洗涤被吸附的ANOT并用80%的乙醇淋洗。使乙醇溶液通过阳离子交换树脂，用4N HCl洗提ANOT。在540nm测定重氮化并与N-1-萘乙二胺偶联所形成的有色化合物。
B 仪器
    
B 氧化铝柱的制备
    将玻璃毛小塞插入色谱管并压到底部。装60g氧化铝，在橡胶塞上轻敲管子压实，至约30cm高。加100ml CHCl3并放到刚好在氧化铝层上方。不要让CHCl3流到氧化铝层面以下。
B.a 色谱管
    600×16mm内径。
B.b 离子交换树脂柱
    180×11mm内径。
B.c 混合器
    具有防爆裂马达的高速、高剪切混合器，约1L容量。
B.d 分光光度计。
    
C 试剂
    
C 离子交换柱的制备
    用400ml 6N HCl，在蒸气浴上加热100g Dowex 50W-X8 2－3h。在瓷漏斗上过滤，用H2O洗到洗液不含酸。用100ml 80%乙醇洗树脂，然后用250ml 80%乙醇与树脂混合。将足量的树脂浆灌入离子交换柱直到沉降后床高约5cm。用25ml 80%乙醇洗树脂。可略增气压提高液体