豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)elisa试剂盒
样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)
取10g粉碎的样品,加 20ml 70%甲醇溶液
强力振荡3分钟
用Whatman No 1滤纸过滤
取25μl处理后的样品,加入25μl样本稀释液于反应孔中(样本稀释倍数为2)
酶免分析步骤
实验须知
实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保证回温充分,否则影响检测的精确度和准确度。
使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
请不要改变分析程序
请使用精确的微量移液器
操作一旦开始,请不要中断任何程序
ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作
为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
分析步骤
预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测. 取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(10×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml标准品溶液
在各标准孔中加入50μl的标准品溶液
在各样品孔中加入50μl样品溶液
在所有孔中加入50μl的抗总黄曲霉毒素抗体酶结合物
轻轻晃动反应板几秒钟。
37℃温浴30min (温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)
甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,zui后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
反应洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50μl显色液A,再加 50μl显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀
37℃温浴10min
每孔中加入50μl终止液,混匀
在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。
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