产品名称

1,4-哌嗪二乙磺酸

CAS NO

5625-37-6

中文别名

哌嗪-1,4-双(2-乙基磺酸);哌嗪-N,N'-双(2-乙磺酸);哌嗪-1,4-双(2-乙烷磺酸);哌嗪-1,4-二乙磺酸;哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)

英文名称

1,4-Piperazinediethanesulfonicacid

英文别名

1,4-Piperazinebis(ethanesulfonicacid); 1,4-Piperazinebis(ethansulfonic acid); NSC 157117; PIPES;Piperazine-1,4-bis(2-ethanesulfonic acid); Piperazine-N,N'-bis(2-ethanesulfonicacid)

分子式

C₈H₁₈N₂O₆S₂

分子量

302.36

EINECS

227-057-6

熔点

>300°C(lit.)

沸点

毒性

生物缓冲剂PIPES，全称1,4-哌嗪二乙磺酸，与Tris一样生物学实验中常用的缓冲剂，而且通常是用于一些对pH缓冲作用及各方面要求较高的一些实验体系中。这里介绍PIPES缓冲剂用于制备感受态细胞实验。

PIPES缓冲剂原料

PIPES制备感受态细胞的意义

通过特定的PIPES缓冲液使细胞处于感受态，可以诱导细胞吸收环境中的外来DNA分子，并且容纳该DNA。这种技术广泛地用于基因工程中，如克隆菌中用于分子克隆、质粒提取。还可将特定蛋白的对应DNA引入表达菌种中，使其表达我们想要合成的特定蛋白，这样可以利用细菌为我们生产特定的蛋白。

当细胞或者细菌处于感受态时，可以从周围环境中摄取DNA分子，并且不易被细胞内的分解，细胞处于一种特殊的生理状态。有些细菌是自然感受态，如，有些是人工感受态，如大肠杆菌。PIPES缓冲剂就可以通过人工的方法，使大肠杆菌处于人工感受态。经过特殊方法处理受体细胞，可改变细胞膜通透性，使其成为容许有外源DNA的载体分子通过的。

细胞感受态PIPES缓冲液的配方

用于制备细胞感受态的PIPES缓冲液也叫TB缓冲液（Transformation Buffer），配制方法为：哌嗪二乙磺酸PIPES 3.0g 10mM、CaCl2·2H2O 2.2g 15mM、KCl 18.6g 250mM，加水 950ml，用5N KOH 调PH至6.7-6.8*低PH不溶，再加终浓度为55mM的MnCl2·4H2O 10.9g定溶到1升，过滤灭菌，4度保存。感受态细菌细胞的转化采用氯化钙的方法，液氮或低温冰箱中取出的大肠杆菌，在LB平板上划线，37度过夜至长出单菌落。

以PIPES配制的TB缓冲液用于细胞感受态制备，适合不含质粒的大肠杆菌，不适用于大质粒，不同细菌的培养的OD600值也有所不同。德晟公司主要是生产会缓冲剂原料，因此提供的是PIPES缓冲剂粉末，需自行配制TB缓冲液。